A kiállítótermekben és a galériákban tilos az ételfogyasztás. A látogatókat arra ösztönözzük, hogy használják az étkezésre kijelölt helyeket, például a kávézót vagy az éttermet.
A vízhordás elengedhetetlen, különösen a melegebb hónapokban. A látogatóknak megengedett, hogy vizes palackokat vigyenek magukkal a múzeumokban; az ivást azonban a lehető legnagyobb óvatossággal kell végezni, hogy elkerüljék a műalkotások vagy történelmi műtárgyak közelében történő kiömlést.
A Sixtus-kápolnában tilos enni és inni, és a látogatóknak tiszteletben kell tartaniuk a hely szent jellegét. Ez magában foglalja az öltözködési szabályok betartását, amelyek tiltják az ujjatlan és mélyen kivágott ruhákat, a térd fölé érő rövidnadrágot, a miniszoknyát és a kalapot.
A Vatikáni Múzeumok többféle kávézót kínálnak azok számára, akik egy gyors harapnivalót vagy egy nyugodtabb ebédet szeretnének elfogyasztani. Az önkiszolgáló kávézó minden korosztály számára kínál ételeket, míg a Fenyőfa udvari Bistrot-ban egy valódi étterem található, ahol különféle menüpontok, többek között saláták és más könnyű ételek is kaphatók.
A vélemények szerint a múzeum kávézója kevésbé kedvező étkezési élményt nyújthat, míg az udvaron található étterem jó ételekről, többek között salátákról és más könnyű ételekről híres. Célszerű ellenőrizni a nyitvatartási időket, mivel azok változhatnak.
A helyi konyha iránt érdeklődők számára a helyszíni éttermek olyan hagyományos olasz ételeket kínálnak, mint a pizza, a tészta és a secondo, amely a főételre használt kifejezés. Általában gyümölcs- és sajtválaszték is rendelkezésre áll, így a látogatók a múzeumokon belül is megízlelhetik Olaszországot.
A különféle diétás korlátozásokra való tekintettel mind a büfé, mind a helyi éttermek gyakran kínálnak vegetáriánus, vegán és gluténmentes lehetőségeket. Az ételallergiás látogatóknak közölniük kell igényeiket az éttermi személyzettel, akik általában segítőkészek és tájékozottak az összetevőkkel kapcsolatban.